2×Rapid Taq Super Mix
מספר חתול: HCR2016A
2×Rapid Taq Super Mix מבוסס על ה-Taq DNA Polymerase המותאם, המוסיף גורם הארכה חזק, גורם שיפור הגברה ומערכת חיץ אופטימלית, עם יעילות הגברה גבוהה במיוחד.מהירות ההגברה של תבניות מורכבות כמו גנום בטווח של 3 קילובייט מגיעה ל-1-3 שניות/ק"ב, וזו של תבניות פשוטות כמו פלסמידים בטווח של 5 קילובייט מגיעה ל-1 שניות/ק"ב.מוצר זה יכול לחסוך מאוד זמן תגובה של PCR.יחד עם זאת, המיקס מכיל dNTP ו-Mg2+, אותם ניתן להגביר רק על ידי הוספת פריימרים ותבניות, מה שגם מפשט מאוד את שלבי הפעולה של הניסוי.יתר על כן, התערובת מכילה צבע אינדיקטור אלקטרופורטי, שיכול להיות אלקטרופורזה ישירות לאחר התגובה.חומר ההגנה במוצר זה גורם לתערובת לשמור על פעילות יציבה לאחר הקפאה והפשרה חוזרת.ניתן לשבט בקלות את פס A של קצה 3' של מוצר ה-PCR לווקטור T.
רכיבים
2×Rapid Taq Super Mix
תנאי אחסון
יש לאחסן את מוצרי PCR Master Mix ב-25~-15℃ למשך שנתיים.
מפרטים
| מפרט מוצר | Rapid Taq Super Mix |
| ריכוז | 2× |
| התחלה חמה | Hot Start מובנה |
| תליה | 3′-A |
| מהירות תגובה | מָהִיר |
| גודל (מוצר סופי) | עד 15 קילובייט |
| תנאים להובלה | קרח יבש |
הוראות
1. מערכת תגובה (50 μL)
| רכיבים | גודל (μL) |
| תבנית DNA* | מַתְאִים |
| פריימר קדימה (10 מיקרומול/ליטר) | 2.5 |
| פריימר הפוך (10 מיקרומול/ליטר) | 2.5 |
| 2×Rapid Taq Super Mix | 25 |
| ddH2O | עד 50 |
2.פרוטוקול הגברה
| מחזור שלבים | טמפרטורה (°C) | זְמַן | מחזורים |
| דנטורציה מוקדמת | 94 | 3 דקות | 1 |
| דנטורציה | 94 | 10 שניות |
28-35 |
| רִכּוּך | 60 | 20 שניות | |
| סיומת | 72 | 1-10 שניות/ק"ב |
שימוש מומלץ בתבניות שונות:
| סוג התבנית | טווח שימוש בפלח (מערכת תגובה של 50 μL) |
| DNA גנומי או נוזל E. coli | 10-1,000 ננוגרם |
| פלסמיד או DNA ויראלי | 0.5-50 ננוגרם |
| cDNA | 1-5 μL (לא יותר מ-1/10 מהנפח הכולל של תגובת ה-PCR) |
| שימוש מומלץ בתבניות שונות | |
הערות:
1.שימוש בריאגנטים: הפשרה מלאה וערבב לפני השימוש.
2. טמפרטורת חישול: טמפרטורת החישול היא ערך ה-Tm האוניברסלי, וניתן להגדיר אותה גם ב-1-2℃ נמוך מערך ה-Tm של ה-primer.
3. מהירות הרחבה: הגדר 1 שנייה/ק"ב עבור תבניות מורכבות כגון גנום ו-E. coli בטווח של 1 kb;הגדר 3 שניות/ק"ב עבור תבניות מורכבות כגון גנום של 1-3 ק"ב ו-E. coli;הגדר 10 שניות/ק"ב עבור תבניות מורכבות מעל 3 ק"ב גנום ו-E. coli.ניתן להגדיר את הערך ל-1 sec/kb עבור תבנית פשוטה כגון פלסמיד פחות מ-5 kb, 5 שניות/kb עבור תבנית פשוטה כגון פלסמיד בין 5 ל-10 kb, ו-10 שניות/kb עבור תבנית פשוטה כגון פלסמיד גדול מ-10 kb.
הערות
1. למען בטיחותך ובריאותך, נא ללבוש מעילי מעבדה וכפפות חד פעמיות להפעלה.
2. מוצר זה מיועד לשימוש מחקר בלבד!
