RT-LAMP קולורמטרי (כדור ליופיליזציה)
מוצר זה מכיל חוצץ תגובה, מיקס אנזימים RT (Bst DNA פולימראז ותעתוק הפוך עמיד בחום), חומרים מגוננים מסולפים ורכיבי צבע כרומוגניים.המוצר הוא מסוג כדור ליאופיל, בשימוש רק עם פריימרים ותבניות.ערכה זו מספקת זיהוי חזותי מהיר וברור של הגברה, אשר תגובה שלילית מסומנת באדום ותגובה חיובית מסומנת על ידי שינוי לצהוב.
רְכִיב
RT-LAMP קולורמטרי מאסטר מיקס (חרוזים מסולפים)
יישומים
להגברה איזותרמית של DNA או RNA.
תנאי אחסון
מועבר ומאוחסן ב 2 ~ 8 ℃.המוצר תקף ל-12 חודשים.
נוהל
1.הוצא את המספר המתאים אבקת חרוזים ליופיליזציה לפי מספר הבדיקות.
2.הכן תערובת תגובה
| רְכִיב | כרך |
| RT-LAMP קולורמטרי מאסטר מיקס (חרוזים מסולפים) | 1 חתיכה (2 חרוזים) |
| 10 × מיקס פריימרa | 5 μL |
| תבניות DNA/RNA b | 45 μL |
הערות:
1. ריכוז 10×Primer Mix: 16 מיקרומטר FIP/BIP, 2 מיקרומטר F3/B3, 4 מיקרומטר לולאה F/B;
2. מומלץ להמיס תבניות של חומצת גרעין באמצעות מי DEPC.
3.דגירה ב-65 מעלות צלזיוס למשך 30-45 דקות, שניתן להאריך אותה כראוי בהתאם לזמן התגובה לשינוי הצבע.
4.לפי עין בלתי מזוינת, צהוב היה חיובי ואדום היה שלילי.
הערות
1.ניתן לבצע אופטימיזציה של טמפרטורת התגובה בין 62 ℃ ל- 68 ℃ בהתאם למצב הפריימר.
2.אין לחשוף את הריאגנטים הארוזים לאוויר במשך זמן רב.
3.תגובת שינוי הצבע האדום והצהוב תלויה בשינוי ה-pH של מערכת התגובה, נא לא להשתמש בתמיסת האחסון המכילה חומצת גרעין Tris, מומלץ להשתמש ב-ddH2O חומצת גרעין מאוחסנת.
4.הניסוי יתבצע בצורה סטנדרטית, לרבות הכנת מערכת תגובה, טיפול בדגימה והוספת דגימה.
5.מומלץ להכין מערכת תגובה בשולחן האולטרה נקי ולהוסיף תבניות במנדף של חדרים אחרים כדי למנוע שווא.
