Ultra Nuclease בדרגת GMP
מספר חתול: HC2016A
UltraNuclease בדרגת GMP מתבטאת ומטוהרת ב-Escherichia coli (E.coli) על ידי הנדסה גנטית ומוכנה תחת סביבות GMP.זה יכול להפחית את הצמיגות של סופרנטנט תאים ו-lysate תאים במחקר מדעי, להגביר את יעילות טיהור החלבון ולשפר את המחקר התפקודי של חלבון.המוצר יכול גם להפחית את שאריות חומצת הגרעין המארח לדרגת pg, לשפר את הביצועים והבטיחות של מוצרים ביולוגיים של יישומים, כולל טיהור וירוסים, ייצור חיסונים וייצור תרופות חלבון/פוליסכריד.חוץ מזה, ניתן ליישם את המוצר גם כדי למנוע התקבצות של תאים חד-גרעיניים בדם היקפיים (PBMC) בטיפול בתאים ובפיתוח חיסונים.
UltraNuclease מסופק בצורה של מגיב מעוקר, הנפלט במאגר (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% גליצרין), עם מראה של נוזל חסר צבע ושקוף.מוצר זה מיוצר לפי דרישות תהליך GMP ומסופק בצורה נוזלית.
רכיבים
UltraNuclease בדרגת GMP (250 U/μL)
תנאי אחסון
המוצר נשלח עם קרח יבש וניתן לאחסן אותו ב-25℃~-15°C למשך שנתיים.
אם המוצר נפתח ונשמר בטמפרטורה של 4℃ במשך יותר משבוע, אנו ממליצים לסנןהמוצר כדי למנוע זיהום מיקרוביאלי.
מפרטים
| מארח ביטוי | E. coli רקומביננטי עם גן UltraNuclease |
| משקל מולקולרי | 26.5 kDa |
| נקודה סואלקטרית | 6.85 |
| טוֹהַר | ≥99% (SDS-PAGE) |
| מאגר אחסון | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% גליצרין |
|
הגדרת יחידה | ההגדרה של יחידת פעילות אחת (U) היא כמות האנזים הרגילהשנה את ערך הספיגה של ΔA260 ב-1.0 תוך 30 דקות ב-2. 625 מ"למערכת תגובה ב-37℃ עם pH של 8.0 (שווה ערך לעיכול מלא של37 מיקרוגרם DNA של זרע סלמון לאוליגונוקלאוטידים). |
הוראות
1. מדגם אוסף
תאים דבקים: הסר את המדיום, שטף את התאים עם PBS והסר את הסופרנטנט.
תאים תלויים: אספו את התאים בצנטריפוגה, שטפו את התאים עם PBS, צנטריפוגה ב-6,000סל"ד למשך 10 דקות, אספו את הכדור.
Escherichia coli: אספו את החיידקים בצנטריפוגה, שטפו פעם אחת עם PBS, צנטריפוגה ב-8,000סל"ד למשך 5 דקות, ואסוף את הכדור.
2. טיפול לדוגמה
טפלו בכדוריות התא שנאספו עם חיץ תמוגה ביחס של מסה (ג) לנפח (מ"ל) 1: (10-20), או בשיטות מכניות או כימיות על קרח או בטמפרטורת החדר (1 גרם של גלולת תאים מכילה בערך
109 תאים).
3. טיפול באנזים
הוסף 1-5mM MgCl למערכת התגובה והתאם את ה-pH ל-8-9.
הוסף UltraNuclease בהתאם ליחס של 250 יחידות לעיכול 1 גרם של כדורי תאים, דגירה בטמפרטורה של 37℃ במשך יותר מ-30 דקות.אנא עיין בטופס "זמן תגובה מומלץ" כדי לבחור אתמשך הטיפול.
4. סופרנטנט אוסף
צנטריפוגה ב-12,000 סל"ד למשך 30 דקות ואסוף את הסופרנטנט.
הערה: אם התמיסה חומצית או בסיסית, או מכילה ריכוז גבוה של מלח, חומרי ניקוי אודנטורנטים, נא להגדיל את מינון האנזים או להאריך את זמן הטיפול בהתאם.
תנאי תגובה מומלציםons
| פָּרָמֶטֶר | מצב אופטימלי | מצב אפקטיבי |
| Mg²+ריכוז | 1-5 מ"מ | 1-10 מ"מ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| טֶמפֶּרָטוּרָה | 37℃ | 0-42℃ |
| ריכוז DTT | 0-100 מ"מ | >0 מ"מ |
| ריכוז מרקפטואתנול | 0-100 מ"מ | >0 מ"מ |
| ריכוז קטיונים חד ערכיים | 0-20 מ"מ | 0-150 מ"מ |
| ריכוז פוספט | 0-10 מ"מ | 0-100 מ"מ |
מוּמלָץ תְגוּבָה זְמַן (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| כמות UltraNuclease (ריכוז סופי) | זמן תגובה |
| 0.25 U/mL | > 10 שעות |
| 2.5 U/mL | > 4 שעות |
| 25 U/mL | 30 דק |
הערות:
נא ללבוש את הציוד הנחוץ, מעיל מעבדה וכפפות, כדי להבטיח את בריאותך ובטיחותך!
