Poly A Carrier RNA

מספר חתול: HC4001A

Poly A, polyadenylate, הוא תערובת של 100 ~ 10000 polyadenylates, אשר מפולמר על ידי polynucleotide phosphorylase במבחנה.In vivo, פולי (a) מתווסף ל-3-טרמינל של mRNA על ידי אנזים כדי לשפר את היציבות של mRNA.ביישום מיצוי חומצת גרעין, הוספת פולי A לליזאט או לתמיסת הקישור יכולה לשפר את התפוקה של DNA ו-RNA.המנגנוןשל פולי A המשפר את התפוקה של חומצת גרעין היא כדלקמן:

1. מגע רווי עם ספיחה פני השטח של פריטים.לרוב מוצרי הפוליפרופילן יש חשמל סטטי על פני השטח, שיספוג חומצות גרעין.RNA נשא יכול להרוות את אלההשפעות ספיחה ומפחיתות את אובדן חומצות הגרעין היעד.

2. Inactivate trace nucleases: ישנם נוקלאזות שונות בדגימות ביולוגיות וסביבה.Poly A יכול להשבית את עקבות נוקלאזות בשלבי החילוץ או השימורלשפר את התפוקה והיציבות של חומצות גרעין מטרה.

3. משקעים משותפים: בשלב טיהור חומצת הגרעין של משקעים או קשירה בתיווך אלכוהול, פולי A יכול להיווצר יחד עם חומצת הגרעין היעד או ליצור חלקיקי פולימר כדילשפר את ההתאוששות.

שיטת שימוש

קח כמות מתאימה של אבקה ליופיליזית, הוסף מים מטופלים ב-DEPC או תמיסת מלח גואנידיןממיסים אותו ל-0.1-1ug/uL, ולאחר מכן ארוז אותו משנה ואחסן אותו ב-20 מעלות צלזיוס.

יישומים

1. מיצוי DNA/RNA וירוס: הוספת 1-5ug Carrier RNA לליזאט יכולה לשפר את התפוקה של RNA/DNA, לייצב את חומצת הגרעין היעד ולהימנע מהשפלה של חומצת הגרעין המטוהרת במהלך האחסון.

2. במיצוי מיקרו DNA/RNA בשיטת ממברנה עמודה (<1ug), הוספת RNA נשא ל-1-5ug תורמת לשיפור התפוקה של חומצת גרעין.

3. בשלב המשקעים והריכוז של חומצת גרעין בתיווך אלכוהול, תוספת של 1-2ug RNA נשא מועילה לשיפור ההתאוששות של RNA מקטע קצר.

4. בתמיסת תגובת PCR הכמותית, הוספת 10-100ng RNA נשא לתמיסת התגובה מועילה לשיפור הרגישות ולהפחתת ה-C_Tערך.