שלב אחד מהיר RT-qPCR Probe Premix-UNG
מספר חתול: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) היא ערכת זיהוי מהירה של RT-qPCR המבוססת על בדיקה המתאימה ל-PCR כמותי יחיד-פלקס או מרובה באמצעות RNA כתבנית (כגון וירוס RNA).מוצר זה משתמש בדור חדש של Taq DNA Polymerase עם שינוי בנוגדנים ותעתוק הפוך ייעודי לשלב אחד, עם חיץ אופטימלי להגברה מהירה, בעל מהירות הגברה מהירה יותר, יעילות הגברה וסגוליות גבוהה יותר.הוא תומך בהגברה מאוזנת הן במפלס בודד והן במרוב של דגימות בריכוז נמוך וגבוה בזמן קצר.
רכיבים
1. חיץ 5×RT-qPCR (U+)
2. תערובת אנזים (U+)
הערות:
א.חיץ 5×RT-qPCR (U+) כולל dNTP ו-Mg2+;
ב.תערובת אנזים (U+) כוללת תעתיק הפוך, Hot Start Taq DNA פולימראז, מעכב RNase ו-UDG;
ג.השתמש בטיפים נטולי RNase, צינורות EP וכו'.
לפני השימוש, ערבבו היטב את מאגר 5×RT-qPCR (U+).אם יש משקעים לאחר ההפשרה, המתן עד שהמאגר יחזור לטמפרטורת החדר, מערבבים וממיסים, ולאחר מכן השתמש בהם כרגיל.
תנאי אחסון
המוצר נשלח עם קרח יבש וניתן לאחסן אותו ב-25~-15℃ למשך שנה.
הוראות
1. תגובה מערכת
| רכיבים | נפח (20 μL תְגוּבָה) |
| 2 × RT-qPCR מאגר | 4μL |
| תערובת אנזים (U+) | 0.8μL |
| פריימר פורוורד | 0.1 ~ 1.0 מיקרומטר |
| פריימר הפוך | 0.1 ~ 1.0 מיקרומטר |
| בדיקה של TaqMan | 0.05~0.25μM |
| תבנית | X μL |
| מים ללא RNase | עד 25μL |
הערות: נפח התגובה הוא 10-50μL.
2. פרוטוקול רכיבה על אופניים (Sטנדרד)
| מחזור שלב | טמפ' | זְמַן | מחזורים |
| תמלול הפוך | 55 ℃ | 10 דק | 1 |
| דנטורציה ראשונית | 95 ℃ | 30 שניות | 1 |
| דנטורציה | 95 ℃ | 10 שניות | 45 |
| חישול/הרחבה | 60 ℃ | 30 שניות |
| פרוטוקול רכיבה על אופניים (מָהִיר) מחזור שלב |
טמפ' |
זְמַן |
מחזורים |
| תמלול הפוך | 55 ℃ | 5 דקות | 1 |
| דנטורציה ראשונית | 95 ℃ | 5 ש' | 1 |
| דנטורציה | 95 ℃ | 3 ש' | 43 |
| חישול/הרחבה | 60 ℃ | 10 שניות |
הערות:
א.טמפרטורת שעתוק הפוך היא בין 50 ℃ ל 60 ℃, הגדלת הטמפרטורה עוזרת להגביר מבנים מורכבים ותבניות תוכן CG גבוה;
ב.יש להתאים את טמפרטורת החישול האופטימלית בהתבסס על ערך ה-Tm של הפריימר, ולבחור את הזמן הקצר ביותר לאיסוף אותות הקרינה בהתבסס על מכשיר ה-PCR בזמן אמת.
הערות
נא ללבוש את הציוד הנחוץ, מעיל מעבדה וכפפות, כדי להבטיח את בריאותך ובטיחותך!
