2×PCR Super Mix (עם צבע)
2× PCR Master Mix מכיל Taq DNA Polymerase, dNTPs ורכיבים אחרים הנדרשים ל-PCR.ה-Master Mix יציב למשך 3 חודשים ב-4℃ עם המייצבים המותאמים אישית שלנו.תמיסת ה-pre-mix מותאמת ל-PCR קונבנציונלי ומוכנה לשימוש על ידי הוספת תבנית DNA ופריימרים.ניתן לטעון את מוצרי PCR ישירות לאלקטרופורזה עם צבע ברומופנול כחול טעון מראש.המוצרים המוגברים מכילים בליטת 3 '-dA וניתן לשבט אותם בקלות לתוך וקטור T.2×PCR Master Mix מפשט את הליך ה-PCR ומפחית זיהום.
תנאי אחסון
יש לאחסן מוצרים ב-25℃~-15℃ למשך שנתיים.
מפרטים
| נאמנות (מול Taq) | 1× |
| התחלה חמה | No |
| תליה | 3 '-א |
| פולימראז | Taq DNA Polymerase |
| פורמט תגובה | SuperMix או מאסטר מיקס |
| מהירות תגובה | תֶקֶן |
| סוג המוצר | PCR מאסטר מיקס (2x) |
הוראות
1.מערכת תגובה
| רכיבים | כרך(μL) |
| תבנית DNA | מַתְאִים |
| פריימר 1 (10 מיקרומול/ליטר) | 2 |
| פריימר 2 (10 מיקרומול/ליטר) | 2 |
| 2× PCR מאסטר מיקס | 25 |
| ddH2O | עד 50 |
2.פרוטוקול הגברה
| מחזור שלבים | טמפרטורה (°C) | זְמַן | מחזורים |
| דנטורציה ראשונית | 94 | 5 דקות | 1 |
| דנטורציה | 94 | 30 שניות | 35 |
| רִכּוּך | 50-60 | 30 שניות | |
| סיומת | 72 | 30-60 שניות/ק"ב | |
| הארכה סופית | 72 | 10 דק | 1 |
הערה:
1) שימוש בתבנית: 50-200ng DNA גנומי;0.1-10ng DNA פלסמיד.
2) מג2+ריכוז: מוצר זה מכיל 3mM של MgCl2, מתאים לרוב תגובות PCR.
3) טמפרטורת חישול: נא לעיין בערך ה-Tm התיאורטי של פריימרים.ניתן להגדיר את טמפרטורת החישול ל-2-5℃ נמוכה מהערך התיאורטי של הפריימר.
4) זמן הארכה: לזיהוי מולקולרי, מומלץ 30 שניות/ק"ב.עבור שיבוט גנים, מומלץ 60 שניות/ק"ב.
הערות
1.מוצרי PCR עם 2× PCR Master Mix אינם מתאימים לאלקטרופורזה של ג'ל פוליאקרילאמיד.
2.למען בטיחותך ובריאותך, נא ללבוש מעילי מעבדה וכפפות חד פעמיות להפעלה.
3.הוא משמש לשימוש מחקר בלבד!
