Multiplex One Step RT-qPCR Premix
תיאור
מספר חתול: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix היא ערכת PCR כמותית המבוססת על RNA כתבנית.בניסוי, שעתוק הפוך ו-PCR כמותי מבוצעים באותה צינור תגובה, המפשטים את פעולת הניסוי ומפחיתים את הסיכון לזיהום.ניתן להשתמש בעיצוב הייחודי של תערובת חיץ ואנזימים במערכת ליופיליזציה חד-שלבית.הערכה משתמשת ב-Reverse Transcriptase עמיד בחום לסינתזה יעילה של cDNA גדיל ראשון באמצעות Hotstart Taq DNA Polymerase להגברה כמותית.הוא מכיל חיץ תגובה אופטימלי, תערובת אנזימים וכו', ונוספו גורמים המעכבים ביעילות הגברה לא ספציפית של PCR ומשפרים את יעילות ההגברה של ריאקציות qPCR מרובות, המאפשרים הגברה כמותית מרובת פלואורסצנציה תוך הבטחת יעילות ההגברה של פריימרים.
רכיבים
| שֵׁם |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. מגן ליו |
מצב תחבורהיוֹן
ת: Lyo-buffer ומגן: -25 ~ -15 ℃, חיי מדף הם שנה.
B: תערובת ליו-אנזים, 2-8 ℃, חיי מדף 6 חודשים.
הוראות הפעלה
1. מערכת תגובה (קח 25μL כדוגמה)
| רכיבים | נפח (μL) | ריכוז סופי |
| ליו-באפר | 6 | 1* |
| Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| מיקס פריימר (10 מיקרומטר) | 1 | 0.1-1uM |
| מיקס בדיקה (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| תבנית RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | עד 25 | - |
2. פרוטוקול אופטימיזציה לאופניים
1) פרוטוקול רכיבה סטנדרטי
| שלב התגובה | טֶמפֶּרָטוּרָה | זְמַן | מחזור | |
| 1 | תמלול הפוך | 50 מעלות צלזיוסa | 10 דק | 1 |
| 2 | דנטורציה ראשונית | 95 מעלות צלזיוס | 5 דקות | 1 |
| 3 | תגובת הגברה | 95 מעלות צלזיוס | 15 שניות | 45 מחזורים |
| 60 מעלות צלזיוסb | 30 שניותc |
2) פרוטוקול רכיבה מהירה
|
| שלב התגובה | טֶמפֶּרָטוּרָה | זְמַן | מחזור |
| 1 | תמלול הפוך | 50 מעלות צלזיוסa | 2 דקות | 1 |
| 2 | דנטורציה ראשונית | 95 מעלות צלזיוס | 2 שניות | 1 |
| 3 | תגובת הגברה | 95 מעלות צלזיוס | 1 שניה |
45 מחזורים |
| 60 מעלות צלזיוסb | 13 שניותc |
הערה:
a) לַהֲפוֹך תַעֲתוּק: הטמפרטורה יכולה לבחור 42°C או 50°C למשך 10-15 דקות.
b) תגובת הגברה: הטמפרטורה מותאמת לפי ערך Tm של הפריימרים המעוצבים.
ג)פלוּאוֹרסצֵנצִיָה אוֹת רְכִישָׁה: נא להגדיר את הליך הניסוי בהתאם לדרישות שלמדריך למכשיר.
מידע טכני/מפרטים
| התחלה חמה | התחלה חמה מובנית |
| שיטת זיהוי | זיהוי פריימר-probe |
| שיטת PCR | שלב אחד RT-qPCR |
| סוג המדגם | RNA |
הערות
1. מוצר זה מיועד לשימוש מחקר בלבד.
2. נא ללבוש את הציוד הנחוץ, מעיל מעבדה וכפפות, כדי להבטיח את בריאותך ובטיחותך!
