Bst 2.0 DNA Polymerase (ללא גליצרול, בצפיפות גבוהה)
Bst DNA polymerase V2 נגזר מ-Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, בעל פעילות 5′→3′ DNA פולימראז ופעילות חזקה של החלפת שרשרת, אך אין פעילות 5′→3′ אקסונוקלאז.Bst DNA Polymerase V2 מתאים באופן אידיאלי לעקירת גדילים, LAMP הגברה איזותרמית (הגברה איזותרמית בתיווך לולאה) ורצף מהיר.Bst DNA פולימראז V2 זה מסוגל לעכב פעילות DNA פולימראז בטמפרטורת החדר, כך שניתן להפעיל אותו ולגבש את מערכת התגובה בטמפרטורת החדר, למנוע הגברה לא ספציפית ולשפר את יעילות התגובה, וגרסה זו יכולה לעבור ליופיליזציה.בנוסף, הוא מסוגל לשחרר את פעילותו בטמפרטורות גבוהות ובכך לבטל את הצורך בשלב הפעלה נפרד.
רכיבים
| רְכִיב | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA פולימראז V2 (ללא גליצרול) (32U/μL) | 0.05 מ"ל | 0.25 מ"ל | 2.5 מ"ל |
| מאגר 10×HC Bst V2 | 1.5 מ"ל | 2×1.5 מ"ל | 3×10 מ"ל |
| MgSO4 (100 מ"מ) | 1.5 מ"ל | 2×1.5 מ"ל | 2×10 מ"ל |
יישומים
1.הגברה איזותרמית של LAMP
2.תגובת עקירה יחידה של גדיל DNA
3.רצף גנים גבוה של GC
4.רצף DNA של רמת ננוגרם.
מצב אחסון
הובלה מתחת ל-0°C ולאחסן ב-25°C~-15°C.
הגדרת יחידה
יחידה אחת מוגדרת ככמות האנזים המשלבת 25 ננומול של dNTP בחומר בלתי מסיס בחומצה תוך 30 דקות ב-65 מעלות צלזיוס.
תגובת מנורה
| רכיבים | 25 μLמערכת |
| מאגר 10×HC Bst V2 | 2.5 μL |
| MgSO4 (100 מ"מ) | 1.5 μL |
| dNTPs (10mM כל אחד) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 ירוק (25×)a | 1.0 μL |
| תערובת פריימרb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (ללא גליצרול) (32 U/uL) | 0.25 μL |
| תבנית | × μL |
| ddH₂O | עד 25 μL |
הערות:
1) א.SYTOTM 16 ירוק (25×): בהתאם לצרכים הניסויים, ניתן להשתמש בצבעים אחרים כתחליפים;
2) ב.תערובת פריימר: מתקבלת על ידי ערבוב של 20 מיקרומטר FIP, 20 מיקרומטר BIP, 2.5 מיקרומטר F3, 2.5 מיקרומטר B3, 5 מיקרומטר LF, 5 מיקרומטר LB ונפחים אחרים.
תגובה ומצב
1 × HC Bst V2 Buffer, טמפרטורת הדגירה היא בין 60°C ל-65°C.
השבתת חום
80 מעלות צלזיוס, 20 דקות.
