פוספטאז אלקליין (ALP)
תיאור
Alkaline Phosphatase מופק מזן E. coli רקומביננטי הנושא את הגן TAB5.האנזים מזרז את דה-פוספורילציה של קצוות 5 ו-3 של פוספומונואסטרים של DNA ו-RNA.כמו כן, הוא מבצע הידרוליזה של ריבוז, כמו גם טריפוספטים של deoxyribonucleoside (NTPs ו-dNTPs).TAB5 Alkaline Phosphatase פועל על קצוות 5' בולטים, 5' שקועים וקהים.ניתן להשתמש ב-Phosphatase ביישומי ביולוגיה מולקולרית רבים, כגון שיבוט או סימון קצוות בדיקה כדי להסיר את הקצוות המזרחנים של DNA או RNA.בניסויי שיבוט, דה-פוספורילציה מונעת מה-DNA הפלסמיד הליניארי מקישור עצמי.זה יכול גם לבזות dNTPs לא משולבים בתגובות PCR כדי להכין תבנית לרצף DNA.האנזים מושבת לחלוטין ובלתי הפיך על ידי חימום ב-70 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות, ובכך מיותר את הסרת הפוספטאז לפני קשירה או סימון קצה.
נוֹהָג
1. phosphatase אלקליין בשילוב חלבונים (נוגדנים, streptavidin וכו') יכול לזהות באופן ספציפי מולקולות מטרה, וניתן להשתמש בו ב-ELISA, WB וזיהוי היסטוכימי;
2. פוספטאז אלקליין יכול לשמש כדי דה-פוספוריזציה של 5'-טרמינל של DNA או RNA כדי למנוע קישור עצמי;
3. ניתן לתייג את ה-DNA או ה-RNA הדה-פוספוריל שלעיל על ידי פוספטים המסומנים ברדיו (דרך T4 poly-nucleotide kinase)
מבנה כימי
מִפרָט
| פריטי בדיקה | מפרטים |
| פעילות אנזים | 5U/μL |
| פעילות אנדונוקלאז | לא זוהה |
| פעילות Exonuuclease | לא זוהה |
| פעילות ניקינג | לא זוהה |
| פעילות RNase | לא זוהה |
| E.coli DNA | ≤1עותק/5U |
| אנדוטוקסין | LAL-Test, ≤10EU/mg |
| טוֹהַר | ≥95% |
הובלה ואחסנה
הוֹבָלָה:AmbIent
אחסון:אחסן ב-2-8 מעלות צלזיוס
בדיקה חוזרת מומלצתחַיִים:שנתיים
