Deoxyribonuclease I (Dnase I)
תיאור
DNase I (Deoxyribonuclease I) הוא endodeoxyribonuclease שיכול לעכל DNA חד או דו-גדילי.הוא מזהה ומבקע קשרים של פוספודיסטר כדי לייצר מונו-דאוקסינוקלאוטידים או אוליגודאוקסינוקלאוטידים חד- או דו-גדילי עם קבוצות פוספט במסוף 5' והידרוקסיל במסוף 3'.הפעילות של DNase I תלויה ב-Ca 2+ וניתן להפעיל אותה על ידי יוני מתכת דו ערכיים כגון Mn 2+ ו-Zn 2+.5 mM Ca 2+ מגן על האנזים מפני הידרוליזה.בנוכחות Mg 2+, האנזים יכול לזהות ולבקע באופן אקראי כל אתר על כל גדיל של DNA.בנוכחות Mn 2+, ניתן לזהות את הגדילים הכפולים של ה-DNA בו-זמנית ולבקע אותם כמעט באותו אתר ליצירת שברי DNA קצה שטוח או שברי DNA קצה דביק עם 1-2 נוקלאוטידים בולטים.
מבנה כימי
הגדרת יחידה
יחידה אחת מוגדרת ככמות האנזים שתפרק לחלוטין 1 מיקרוגרם של pBR322 DNA תוך 10 דקות ב-37 מעלות צלזיוס.
מִפרָט
פריטי בדיקה | מפרטים |
טוהר (SDS-PAGE) | ≥ 95% |
פעילות RNAse | אין השפלה |
זיהום gDNA | ≤ 1 עותק/μL |
הובלה ואחסנה
הוֹבָלָה:נשלח מתחת ל-0 מעלות צלזיוס
אִחסוּן:אחסן ב-25~-15 מעלות צלזיוס
בדיקה חוזרת מומלצת חיים:שנתיים